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離心濃縮儀的相關(guān)知識點介紹

更新時間:2024-01-31  點擊次數(shù):3011

離心濃縮儀作為配有抗腐蝕化學(xué)隔膜泵的完整系統(tǒng)的一部分或是作為一個便于升級的基本配置,確保高效、平緩地對您的樣品(如DNA/RNA,蛋白質(zhì))進行真空濃縮。對于許多提供商業(yè)化高通量測序服務(wù)的實驗室,由于必須濃縮處理大量低濃度DNA樣品,是該款真空離心濃縮儀的“用武之地”。也許有人會考慮通過應(yīng)用不同方法(如乙醇沉淀;反復(fù)濃縮以達到濃縮核酸的目的,但是這種操作既耗時且損失大量樣品,無法保障準(zhǔn)確測序的要求而被此類實驗室挨棄。另外,濃縮干燥DNA樣品也要把握適度原則,否則樣品中濕度過低,DNA不易重溶,一樣會影響后續(xù)實驗的效果。

  離心濃縮儀測試方法:

  1.再濃縮DNA樣品

  許多時候,當(dāng)完成循環(huán)測序通過聚丙烯酰胺凝膠分離后,卻發(fā)現(xiàn)結(jié)果不盡如人意,我們首先需要考慮DNA樣品是否濃縮不足?除了通過比色分析濃度、通過將樣品溶入少量溶劑濃縮樣品外,推薦您使用5301真空離心濃縮儀再濃縮DNA樣品,通過加熱60℃與“功能1”命令,僅需30分鐘就可將150ulDNA水溶液濃縮至10ul,而且不影響DNA之后在測序中的反應(yīng)。相同的參數(shù)條件也可用于測序中使用的引物濃縮。

  對于比較敏感的樣品,我們不必機械地選擇溫度參數(shù),可以適當(dāng)?shù)剡x擇相對低的溫度,只要相應(yīng)延長離心濃縮的時間即可。

  2.去除DNA樣品中的醇殘留

  無法對重溶的DNA樣品進行標(biāo)準(zhǔn)的測序反應(yīng),可能是由于DNA樣品中存在醇污染,通過5301真空離心濃縮儀加熱60℃與“功能1”命令,4分鐘內(nèi)就可將DNA樣品中的醇殘留去除。

  3.分裝酶

  通過分別稱量分裝小量酶如RNase至微量檢測管,想來就是件費時費力的工作。為了在每個微量檢測管中加入1mg酶,先將100mg酯溶入1ml水中,在多道移液器的幫助下在每個微量檢測管中加入10ul酶溶液,接下來就是5301真空離心濃縮儀的強項,45℃與“功能”命令,5分鐘內(nèi)就可將酶溶液中的水份完全蒸發(fā)。

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